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qPCR中的絕對定量是什么？
發(fā)布時間： 2021-10-14 點擊次數(shù)： 4164次絕對定量目的是使用PCR測定目的基因在樣本中的數(shù)量，即拷貝數(shù)。
在絕對定量中，想要得到目的基因的拷貝數(shù)，需要制作標準曲線圖。制作標準曲線圖需要將標準品稀釋至不同濃度，作為模板進行PCR。標準品是已知濃度的模板。
結(jié)束PCR后，以測得的CT值為縱坐標，標準品濃度的對數(shù)值為橫坐標，繪制標準曲線圖。
對待測樣品的目的基因進行檢測時，只需要將得到的CT值代入標準曲線圖，即可計算出樣品中目的基因的拷貝數(shù)。
需要注意的是：
1、標準品必須來源可靠、濃度已知
2、標準品要和待測樣品要同時在儀器中擴增
3、只能根據(jù)標準品覆蓋的濃度范圍，進行樣品濃度的推測
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