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    常用的卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)及細(xì)胞表達(dá)

    發(fā)布時(shí)間: 2021-10-09  點(diǎn)擊次數(shù): 4427次

    整理一篇關(guān)于卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法和細(xì)胞的特征特點(diǎn),由于卵巢癌早期缺少癥狀,即使有癥狀也不特異,篩查的作用又有限,因此早期診斷比較困難,就診時(shí)60%~70%已為晚期,而晚期病例又療效不佳,卵巢癌方向的研究也成為了目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究重點(diǎn),下面我們分享部分我們實(shí)驗(yàn)室有的卵巢細(xì)胞株的培養(yǎng)方法和特征。       

    部分細(xì)胞形態(tài)

    image.png

    CELL Name:NIH OVCAR

    image.png

    Cell Name:SK-OV-3



    細(xì)胞系
    形態(tài)特征培養(yǎng)基
    其他
    ID8小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞單層,貼壁生長

    90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 雙抗(SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0101);

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    在C57BL/6小鼠體內(nèi),可導(dǎo)致腹腔腫瘤和腹水的形成;常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型

    caov-3

    人;卵巢腺癌細(xì)胞

    來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞樣

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP(SD0008)+G/A (SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0125)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


    Caov-4

    人;腺癌

    來源于轉(zhuǎn)移部位:輸卵管的漿膜下層;上皮細(xì)胞;貼壁Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入20%胎牛血清FBS

    CHO

    倉鼠;卵巢細(xì)胞


    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0401)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


    CHO-K1

    倉鼠;卵巢細(xì)胞亞株

    來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞

    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0401)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液 (SD0002)


    CHO/dhFr-

    倉鼠;卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷

    來源于正常卵巢組織;上皮細(xì)胞IMDM培養(yǎng)基加入10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清FBS;添加0.1mM次黃嘌(漂)呤,0.016mM胸腺嘧啶,100nM氨甲喋呤。該細(xì)胞為二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞。  在沒有HT(次黃嘌(漂)呤-胸腺嘧啶)時(shí)細(xì)胞會(huì)死亡。細(xì)胞培液中加氨甲喋呤可以防止對(duì)藥物低抗性的回變細(xì)胞的生長。
    CTLA4 Ig-24倉鼠;卵巢細(xì)胞來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0101)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


    ES-2

    人;卵巢透明細(xì)胞癌

    來源于低分化卵巢透明細(xì)胞癌組織;成纖維細(xì)胞;貼壁;致癌

    90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0901)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    在裸鼠中成瘤。該細(xì)胞對(duì)多種化療藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性。ES-2細(xì)胞表達(dá)低水平的P糖蛋白。

    HEY

    人;III期卵巢乳頭狀囊腺癌

    來源于子房組織;上皮細(xì)胞;貼壁;致癌

    90%1640基礎(chǔ)(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038)  

    *培養(yǎng)基鏈接:1640*培養(yǎng)基(MD0201)


    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    HEY細(xì)胞系對(duì)烷基化劑順二胺二氯鉑(II)(順鉑)表現(xiàn)出一定程度的抗性

    HO-8910

    人;卵巢癌細(xì)胞

    來源于卵巢癌病人腹水中;上皮細(xì)胞樣RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。
    HO-8910PM人;高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞
    RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。

    Lec1

    倉鼠;卵巢細(xì)胞

    來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞

    90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L(SD0014)+葉酸 8.82mg/L(SD0016)+β-巰基乙醇 7.8mg/L(SD0031)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:αMEM*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0807)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶,從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。對(duì)于研究N-連接糖基化改變對(duì)內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響,這些細(xì)胞十分有用。

    NIH:OVCAR-3

    人;卵巢癌細(xì)胞

    來源于卵巢腺癌病人惡性腹水;上皮細(xì)胞;貼壁;致癌

    80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰島素(SD0020)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:1640*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0220)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個(gè)合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體,這對(duì)于激素治療的評(píng)估或許是有用的。

    OV-90

    人;3級(jí),IIIC期,惡性乳頭狀漿液性腺癌

    來源于卵巢癌轉(zhuǎn)移部位:腹水;上皮;貼壁;致癌

    42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS(SD0200)+1%GA(SD0038)

    *培養(yǎng)基:MCDB105/M199*培養(yǎng)基(MD1203)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    致病基因:her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon   215) Ref

    表達(dá)角蛋白基因

    SK-OV-3

    人;卵巢癌細(xì)胞

    來源于卵巢腺癌,腹水轉(zhuǎn)移;上皮細(xì)胞

    90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0901)

    氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    此細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受,

    SW 626

    人;III期腺癌

    來源于子房組織;上皮細(xì)胞;貼壁;致癌Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入10%胎牛血清FBS

    TOV-21G

    人;3級(jí),III期,原發(fā)性惡性腺癌; 透明細(xì)胞癌

    來源于:子房;上皮細(xì)胞;貼壁;致癌含有1.5g / L碳酸氫鈉的MCDB105培養(yǎng)基和含有2.2g / L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基以1:1混合。再加入15%胎牛血清FBS

    致病基因:p53 +(野生型)

    表達(dá)角蛋白基因

    UACC-1598

    人;4級(jí)囊腺癌

    來源于子房組織;上皮細(xì)胞樣;貼壁Leibovitz的L-15培養(yǎng)基加入轉(zhuǎn)鐵蛋白0.01 mg / ml;0.01 mg / ml胰島素;5μg/ mL(55 U / ml)過氧化氫酶;3.6μg/ mL(0.01 mM)氫化可(啲)的松;70μg/ mL(0.5mM)鄰磷酸乙醇胺;10 ng / ml人重組表皮生長因子(EGF);3 ng / ml(0.01μM)雌二醇;0.8 ng / ml(1 pM)Na-L-甲狀腺素;額外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS

    受體表達(dá):低表達(dá)表皮細(xì)胞生長因子受體

    致病基因:表達(dá)N-myc, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2);低表達(dá)c-erbB2; 不表達(dá)ras

    表達(dá)基因:不表達(dá)細(xì)胞角蛋白(MAK-6),黃體酮,ras;低表達(dá)c-erbB2;表達(dá)N-myc, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2)。

    UWB1.289

    人;卵巢癌

    上皮細(xì)胞樣;貼壁

    50%的RPMI-1640培養(yǎng)基和50%的MEGM(來自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生長培養(yǎng)基(MEGM Bullet   Kit; CC-3150)由MEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)基和SingleQuot添加劑制成(ATCC不使用慶大霉素 - 兩性霉素B)。加入3%胎牛血清FBS

    注意:不要過濾*培養(yǎng)基。

    表達(dá)致病基因:p53

    表達(dá)抗體:表達(dá)細(xì)胞角蛋白7(CK-7),鈣網(wǎng)膜蛋白,Wilms的腫瘤蛋白(WT);不表達(dá)BRCA1

    表達(dá)受體:不表達(dá)雌激素和黃體酮

    UACC-2727上皮樣,貼壁

    90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038)

    定制*培養(yǎng)基:L-15*培養(yǎng)基(貨號(hào):MD0000)

    氣相:空氣,100%;二氧化碳,0%。溫度:37攝氏度

    凍存條件/Cryopreservation:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

    her2/neu(+);EGFR(+);N-myc(+)MAK-6(+)




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